在食品安全檢測中應用ATCC8739大腸桿菌時，需要注意以下幾方面問題：

菌株的保存與復蘇

保存條件：應嚴格按照要求在-20°C以下密閉保存凍干品，以保證菌株的活性和穩(wěn)定性，避免因保存溫度不當導致菌株死亡或變異。

復蘇操作：復蘇時要使用合適的培養(yǎng)基和正確的操作方法。例如采用 MH 培養(yǎng)基或 TSB 培養(yǎng)基，在 37℃有氧條件下進行培養(yǎng)。

防止污染：無論是保存還是復蘇過程，都要防止其他雜菌的污染。接種過程應在生物安全柜中進行，使用的器材和試劑都要經過嚴格的滅菌消毒。

實驗操作過程

無菌操作：整個檢測過程必須嚴格遵循無菌操作原則，防止引入其他雜菌影響檢測結果的準確性。操作人員要做好個人防護和實驗環(huán)境的清潔消毒，使用的儀器設備、培養(yǎng)皿、移液管等都要經過滅菌處理。

準確接種：接種時要確保接種量準確、均勻，避免接種量過多或過少影響檢測結果的判定。同時，要注意接種的方式和部位，保證菌株能夠在培養(yǎng)基上良好生長。

培養(yǎng)條件控制：嚴格控制培養(yǎng)溫度、時間和氣體環(huán)境等條件。ATCC8739大腸桿菌的適宜培養(yǎng)溫度為 37℃，需根據(jù)具體的檢測方法和要求，準確控制培養(yǎng)時間，以確保檢測結果的可靠性。

檢測方法的選擇與驗證

方法適用性：根據(jù)不同的食品樣品類型和檢測目的，選擇合適的檢測方法。常見的檢測方法包括多管發(fā)酵法、濾膜法、平板計數(shù)法、氣相色譜法、高效液相色譜法、ATP 生物發(fā)光技術、PCR 檢測技術等，各方法都有其優(yōu)缺點和適用范圍，需綜合考慮后選擇。

方法驗證：在使用選定的檢測方法前，要進行方法驗證，確保該方法能夠準確、可靠地檢測出ATCC8739大腸桿菌。驗證內容包括檢測限、回收率、精密度、準確度等指標，以保證檢測結果的有效性。

質量控制與結果判定

陽性對照與陰性對照：設置陽性對照和陰性對照是保證檢測結果準確性的重要措施。陽性對照應使用已知的ATCC8739大腸桿菌菌株，陰性對照則使用無菌水或其他無大腸桿菌污染的樣品，通過對照實驗可以排除實驗過程中的假陽性或假陰性結果。

結果判定標準：熟悉并嚴格按照相關標準和規(guī)范對檢測結果進行判定。不同的檢測方法和食品類型可能有不同的判定標準，例如在菌落計數(shù)法中，要根據(jù)規(guī)定的稀釋度和菌落數(shù)范圍來確定食品中大腸桿菌的含量是否超標。